组织/细胞基因组DNA提取试剂盒
Tissue and Cell Genomic DNA Purification Kit
组织/细胞基因组DNA提取试剂盒(含蛋白酶K)
XYJHTECH组织/细胞基因组DNA提取试剂盒可以高效、专一结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,适用于含或不含抗凝剂、新鲜或冷冻的血液、各种动物细胞培养液、动物组织等样品。吸附柱内采用独特的吸附材料,与常用硅胶膜相比可更加高效、专一地吸附核酸分子。 使用本试剂盒提取基因组DNA具有如下特点:高得率、高纯度,无须使用苯酚、氯仿等有毒试剂。可从25mg动物组织或1×107个细胞中,快速提取10-30μg高质量的基因组DNA,提取的DNA可直接用于PCR/Real time PCR、限制性酶切、Southern blot、测序、mutant analysis和SNP等下游应用实验。
主要特点:
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快速、简便,40分钟内完成提取
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安全、无毒,无需酚/氯仿抽提
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DNA完整性高
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高灵敏度,优化微量样本的提取能力,可从最少50个细胞中提取基因组DNA,十分适合从微量样本中提取DNA。
主要应用:
1、PCR/Real time PCR; 2、限制性酶切; 3、Southern blot; 4、测序; 5、mutant analysis; 6、SNP等。
存储条件:
本试剂盒在室温(15-25℃)条件下可保存一年。单独包装的蛋白酶K冻存于-20℃,可保存一年。
核酸提取中的技术问题
核酸抽提中的温度问题?
参考见解:核酸抽提中的温度问题,也是一个值得关注的问题。首先要明确的一点是,任何一个温度条件,对某些方面有利,同时也一定会有不利的一面。如沉淀,低温操作会提高得率,但也会增加杂质的残留。任何一步操作该用什么温度为好,应该是利弊权衡的结果。基本上,除了一些特殊的步骤,如消化等外,用室温是最好的选择。那些认为“低温操作可以防止或者减少降解”之类的理由,并没有多少可操作性的。低温的确可以减低酶的活性,但低温同时也降低了这些酶被裂解液中的试剂灭活或者抑制的速度,此消彼长,没有办法给出结论的。就 RNA 抽提而言,彻底匀浆前在冰上操作可以降低 RNA 被降低的风险,彻底匀浆后的温度对 RNA 的完整性影响已经不会大的;如果发现影响很大,说明 RNase 没有被裂解液有效抑制,提示裂解液的用量不足。更没有道理的是认为低温沉淀和低温洗涤可以防止降解了。事实上,核酸一旦被沉淀下来,对酶的耐受力是很强的,这就是核酸保存在醇溶液中最稳定的理论基础。如果说沉淀使用低温还可以提高得率,洗涤使用低温又是为什么?彻底的错误而已。
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