设为首页 添加收藏
 
 
首 页 公司简介 产品展示 最新动态 技术支持 自主研发 诚聘英才 联系我们 在线服务
 
 
 
 
   技术资料
DNA提取
蛋白消化率测定
细胞因子
免疫试剂说明书
技术资料
全部技术资料
您当前位置:首页 > 技术资料 > 全部技术资料
 
组织/细胞基因组DNA提取


 组织/细胞基因组DNA提取

◆     问题与解决方法

问题
评论与建议
DNA产量低
*组织块太大,蛋白酶K消化不完全-建议:液氮研磨或者尽量将组织切成小块,或者延长蛋白酶K消化时间至过夜或者在原有消化基础上另加20μl蛋白酶K消化1-2小时。
*蛋白酶K失效了-建议:收到蛋白酶K后,按照每次使用量分装冻存,避免反复冻融。
*裂解不完全或者和异丙醇没有充分混匀-建议:加入结合液后,和加入蛋白酶K后立即吹打或者涡旋混匀;加入异丙醇后立即吹打或者涡旋混匀才加入吸附柱,如果太粘稠必须涡旋振荡15秒充分混匀。
组织DNA
降解了
*组织中核酸酶活性导致降解-建议:样品处理前妥善保存在-20℃,处理量不要过量。
未提取到DNA
*漂洗液WB中忘记加无水乙醇-建议:第一次实验时,在漂洗液WB中加入指定量无水乙醇。
洗脱下来的
DNA
产量低
*离心柱残留有较多乙醇或者底部不慎沾有乙醇-建议:确保做了步骤7,否则残留乙醇会影响洗脱效率。
*使用了水或者其它非最佳液体代替洗脱缓冲液-建议:仔细阅读仔细阅读注意事项5和步骤8和只使用洗脱缓冲液EB洗脱。
A260吸光值
异常偏高
*一些硅基质膜成分一起洗脱下来,干扰了吸光值-建议:将洗脱的基因组DNA溶液13,000rpm再离心一分钟,小心取上清使用。
DNA下游酶切
不能切开或者
酶切不完全
*一些硅基质膜成分一起洗脱下来,抑制了酶切反应-建议:将洗脱的基因组DNA溶液13,000rpm再离心一分钟,小心取上清使用。
*离心柱残留有较多乙醇或者底部不慎沾有乙醇抑制了酶切反应-建议:确保做了步骤7,然后空气中晾几分钟,让残留乙醇挥发。
 
 

版权所有:北京欣源佳和生物科技有限公司 Copyright@2005-2021 By www.xyjhtech.com
公司地址:北京市海淀区北太平庄路甲1号集贤物业308室 电话::010-62388118 / 62076380 | 邮箱:master@xyjhtech.com
友情提示:严禁以任何形式的复制或抄袭 违者必究