胞核-胞浆-胞膜制备试剂盒
描述:
Nucl-Cyto-Mem Preparation Kit从哺乳动物新鲜或冻存的组织块、贴壁或悬浮培养细胞中,制备细胞核、细胞膜与胞内质膜、细胞浆等三种主要亚细胞组分。独特的试剂成分与优化的制备方案相结合,使胞核-胞膜-胞浆制备简单易行。无需特殊设备和超速离心,只需要玻璃匀浆器和微型高速离心机,在1小时内完成。
制备的细胞核、细胞浆组分纯度甚高,而且较少交叉污染。单一的细胞膜的纯化是一个特殊问题,本试剂盒制备的胞膜是细胞膜和细胞器如线粒体、内质网、高尔基体及其质膜的混合物。制备的细胞核是完整的未裂解的细胞核,但胞浆组分为可溶性胞浆蛋白。制备的亚细胞组分的纯度可胜任后续免疫共沉淀、SDS-PAGE、2-D gel电泳、Western Blot、酶活性测定、受体分析等。
组成:
(100 extractions, 8 x 106 ~ 1 x 107 cells per extraction)
CER, Cytosol Extraction Reagent,50 ml
MER, Membrane Extraction Reagent,5 ml
NER, Nuclear Extraction Reagent,100 ml
Suspension Buffer,20 ml
储存:
4 ºC避光保存1年。
说明:
1. 制备的亚组分可直接进行蛋白含量测定、酶活性测定、受体分析。但进行免疫共沉淀、SDS-PAGE、2-D gel电泳、Western Blot之前,需要1:1加入自备的2x样品缓冲液(含去垢剂如NP-40、Triton X-100、SDS)。用户可不用Kit中的Suspension Buffer,而直接用自行配制的样品缓冲液重悬胞核或胞浆沉淀。
2. 如果为凝胶阻滞实验(EMSA)目的提取核蛋白,建议用HCP1200: 核-胞浆蛋白制备试剂盒 (Nuclear-Cytosol Extraction Kit),该试剂盒并非提取完整的细胞核,而是直接提取可溶性核蛋白,可用于EMSA或Western Blot分析。 |