λ噬菌体基因组DNA快速提取试剂盒
试剂盒组成、储存、稳定性:
试剂盒组成 |
保存 |
50次 |
100次 |
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RNase A |
-20℃ |
20 mg |
20 mg X 2 |
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DNase I |
-20℃ |
50 mg ×2 |
100 mg ×2 |
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噬菌体沉淀液 |
室温 |
100 ml |
200 ml |
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裂解缓冲液 |
室温 |
30 ml |
60 ml |
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杂质沉淀液 |
室温 |
5 ml |
10 ml |
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结合液LB |
室温 |
20 ml |
40 ml |
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漂洗液WB |
室温 |
15 ml |
2×15 ml |
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第一次使用前按说明加指定量乙醇 |
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洗脱缓冲液EB |
室温 |
10 ml |
20 ml |
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RNase-free 吸附柱RA和收集管 |
室温 |
50 套 |
100套 |
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本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:
在RNase A管和DNase I管分别加入1毫升的裂解缓冲液吹打,颠倒混匀,充分溶解RNase A和DNase I后,按照每次使用量分装-20℃冻存,有效期6个月。
结合液LB低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
产品介绍:
λ噬菌体载体广泛用于文库筛选,目的克隆培养获得大量的噬菌体颗粒需要提取λ噬菌体DNA来开展测序等后续工作。λ噬菌体裂解培养物离心后的上清,首先用RNase A /DNase I混合酶消化去除残留的宿主菌DNA/RNA,沉淀收集噬菌体,噬菌体被SDS裂解,残留碎片通过沉淀离心去除掉。裂解物上清中的λ噬菌体DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将λ噬菌体DNA从硅基质膜上洗脱。
产品特点:
不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
节省时间,简捷,可用于液体培养裂解物和固体培养板的提取,单个样品操作一般可在1.5小时内完成。
产量高,典型的产量10ml λ噬菌体裂解培养物上清可以提取约10µg λ噬菌体DNA
多次柱漂洗确保高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9。可以直接用来酶切和测序。
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