Taq DNA Polymerase(Buffer+)
产品组成、储存、浓度:
组成 |
XY0122 |
XY0123 |
XY0123a |
Taq DNA
Polymerase |
500U |
1000U |
3000U |
10×Taq Buffer+
(with Mgcl2) |
1ml |
2×1ml |
6×1ml |
储存:-20 ℃ 保存。浓度: 5U/µl
制品说明:Taq DNA Polymerase 是从克隆有Thermu aquaticus DNA Polymerase 基因的大肠杆菌经诱导表后分离纯化的,其分子量为94 KD。Taq DNA Polymerase具有5′-3′DNA聚合酶活性和5′-3′外切核酸酶活性,无3′-5′外切酶活性。在PCR反应中,Taq DNA Polymerase 延伸速度为1-2 kb/分钟,产物3′端带A,可直接用于T/A载体克隆。
活性单位:1 单位(U)Taq DNA Polymerase 活性定义为在74℃、30分钟内,以活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板引物,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸不溶物质所需的酶量。
质量控制:SDS-PAGE 检测纯度大于99%,经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余DNA,能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。
酶贮存缓冲液:
20mM Tris-HCl (pH8.0), 0.1 mM EDTA, 1mM DTT, 100 mM KCl, Stabilizers, 50% glycerol。
10×Taq Buffer (含Mg2+):
200 mM Tris-HCl (pH 8.4), 200 mM KCl, 100 mM(NH4)2 SO4,15 mM MgCl2,其他成分。
★ 10×Taq Buffer 分为含Mg2+ 和不含Mg2+ 两种,可自选。
★ 不含Mg2+ 的Buffer,另外配有25 mM MgCl2。
★ 如果没有特别指定,通常提供的为含有Mg2+的Buffer。
适用范围: 一般用于DNA片断的PCR扩增、DNA标记、引物延伸、序列测定、平末端加A 等,产物可以直接用于T/A载体克隆。
建议的PCR 条件: (以 50 μl 反应体系为例)
Template <0.5 μg
Forward Primer (10 μM) 1 μl
Reverse Primer (10 μM) 1 μl
10×Buffer+ (with mgcl2) 5 μl
dNTP Mixture(各2.5mM) 4 μl
Taq DNA polymerase(5U/μl) 0.5~1 μl
dH2O up to 50 μl
PCR 反应循环的设置:
94oC: 2-5 min
94oC: 30 sec
50-60oC: 30 sec 30 cycles
72oC: 1 min/1-2 kb
72oC: 5-10 min
|